一、 CRISPR/Cas9技術原理
CRISPR/Cas9(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是最近幾年新出現的一種基因組編輯工具,它能夠完成RNA導向的DNA識別及編輯。與ZFN和TALEN技術相比,CRISPR/Cas9技術更易于操作,具有更強的可擴展性。CRISPR技術使用一段序列特異性向導RNA分子(sequence-specific guide RNA,sgRNA)引導高度保守的CRISPR相關基因(Crispr- associated gene, Cas gene, Cas9)編碼的核酸內切酶,到靶位點處對DNA序列進行特異性的切割,并引入單個或多個堿基的插入或缺失突變,從而完成基因組的編輯。目前,CRISPR/Cas9系統的高效基因組編輯功能已被應用于多種模式生物,包括擬南芥、煙草、水稻等植物、人、小鼠、斑馬魚、秀麗隱桿線蟲及細菌。
二、CRISPR/Cas9載體構建服務
1 實驗技術路線及周期
技術優勢
1、Crispr/Cas9基因編輯技術易操作,基因敲除效率高,成本低。
2、本公司有針對不同物種的CRISPR/Cas9載體,可根據客戶的實驗材料而定。
3、本公司使用ClonExpress?技術,無須中間載體,一步將目的片段和載體無縫連接。
4、針對客戶的目的基因,可一次設計2-3個gRNA靶點構建載體,提高基因敲除效率。
2 服務參數
分項內容 |
周期(工作日) |
價格 |
植物CRISPR/Cas9載體 |
10 |
|
3實驗結果提交形式
序號 |
名稱 |
交付形式 |
1 |
項目報告(含實驗數據) |
Word文檔電子版 |
2 |
實驗過程圖片 |
JPG或TIF電子版 |
3 |
陽性質粒測序數據 |
電子版 |
4 |
陽性克隆質粒及菌液 |
菌液≥2 ml 質?!?/span>20 μl |
5 |
載體圖譜和注釋信息 |
Word文檔電子版 |
三、 CRISPR/Cas9載體遺傳轉化服務
CRISPR/Cas9基因編輯技術能精確的對基因靶點進行切割產生突變,達到沉默基因的目的,這類載體的遺傳轉化也依托于植物組織培養技術。
1 技術路線和周期

2 服務參數
分項內容 |
周期(工作日) |
價格 |
煙草遺傳轉化 |
2-3月 |
|
煉苗移栽(可選) |
15 |
|
檢測陽性CAS9植株,靶基因測序擴增 |
14 |
|
3 實驗結果交付
序號 |
名稱 |
交付形式 |
1 |
項目報告(含實驗數據) |
Word文檔電子版 |
2 |
實驗過程圖片 |
JPG或TIF電子版 |
3 |
測序數據 |
電子版 |
4 |
載體說明書 |
PDF文檔電子版 |
5 |
轉基因煙草瓶苗或移栽苗 |
20-40株 |
6 |
CRISPR/Cas9載體質粒和菌株 |
菌液≥2 ml 質?!?/span>20 μl |