一、 CRISPR/Cas9技術原理

CRISPR/Cas9Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是最近幾年新出現的一種基因組編輯工具,它能夠完成RNA導向的DNA識別及編輯。與ZFNTALEN技術相比,CRISPR/Cas9技術更易于操作,具有更強的可擴展性。CRISPR技術使用一段序列特異性向導RNA分子(sequence-specific guide RNA,sgRNA)引導高度保守的CRISPR相關基因(Crispr- associated gene, Cas gene, Cas9)編碼的核酸內切酶,到靶位點處對DNA序列進行特異性的切割,并引入單個或多個堿基的插入或缺失突變,從而完成基因組的編輯。目前,CRISPR/Cas9系統的高效基因組編輯功能已被應用于多種模式生物,包括擬南芥、煙草、水稻等植物、人、小鼠、斑馬魚、秀麗隱桿線蟲及細菌。


二、CRISPR/Cas9載體構建服務

1 實驗技術路線及周期

 

技術優勢

1、Crispr/Cas9基因編輯技術易操作,基因敲除效率高,成本低。

2、本公司有針對不同物種的CRISPR/Cas9載體,可根據客戶的實驗材料而定。

3、本公司使用ClonExpress?技術,無須中間載體,一步將目的片段和載體無縫連接。

4、針對客戶的目的基因,可一次設計2-3gRNA靶點構建載體,提高基因敲除效率。

服務參數

分項內容

周期(工作日)

價格

植物CRISPR/Cas9載體

10

 


3實驗結果提交形式

序號

名稱

交付形式

1

項目報告(含實驗數據)

Word文檔電子版

2

實驗過程圖片

JPGTIF電子版

3

陽性質粒測序數據

電子版

4

陽性克隆質粒及菌液

菌液≥2 ml

質?!?/span>20 μl

5

載體圖譜和注釋信息

Word文檔電子版


三、 CRISPR/Cas9載體遺傳轉化服務

CRISPR/Cas9基因編輯技術能精確的對基因靶點進行切割產生突變,達到沉默基因的目的,這類載體的遺傳轉化也依托于植物組織培養技術。

1 技術路線和周期

服務參數

  分項內容

周期(工作日)

價格

煙草遺傳轉化

2-3

 

煉苗移栽(可選)

15

 

檢測陽性CAS9植株,靶基因測序擴增

14

 

實驗結果交付

序號

名稱

交付形式

1

項目報告(含實驗數據)

Word文檔電子版

2

實驗過程圖片

JPGTIF電子版

3

測序數據

電子版

4

載體說明書

PDF文檔電子版

5

轉基因煙草瓶苗或移栽苗

20-40

6

CRISPR/Cas9載體質粒和菌株

菌液≥2 ml

質?!?/span>20 μl